(1) 用生物信息學方法分析并預測啟動子區可能的轉錄因子結合位點。(2)設計引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動子片段,將此片段插入到熒光素酶報告基因質粒(pGL3-basic)中。(3)篩選陽性克隆,測序。擴增克隆并提純質粒備用。
他們公司的口碑挺好的,我用過他們的儀器還有試劑,有專業的人上門培訓,沒有專業知識也可以操作。
進口的有:abi的,bio-rad的iq5
appliedbiosystems公司的7700型實時熒光定量pcr儀是全球公認的熒光定量pcr的金標準
bioneer:國內的用戶可能聽說過這個品牌的不多,只有早期較多使用進口引物的實驗室和研究所或留美學者知道這個品牌。bioneer最初是以高通量的引物合成起家,引物合成在國際上有很高的知名度。后經10幾年發展產品線已覆蓋整個分子生物學領域,目前同takara的產品線幾乎完全一樣。bioneer的普通梯度pcr儀的價格同其他進口設備的價位比較,很具有殺傷力。這家公司也于2006年底推出了熒光定量pcr儀exicyclertm96,產品技術參數也是采用96孔peltier半導體加熱,5通道,16bitccd檢測,也帶有梯度功能。這款產品的參數幾乎與bio-rad的iq5一模一樣,而且檢測的ccd像素還要高于iq5,理論上檢測靈敏度應該更好一些。產品價格據說還要比bio-rad更低一些,號稱是性價比最高的熒光定量pcr儀。但是缺點是現在國內用戶很少,了解起來不太容易。有興趣的客戶可以聯系北京力途科技有限公司進行試用,新公司都注重是售后服務,大家畢竟要親身體會到才是最可靠的。
stratagene:stratagene現在為安捷倫公司的子公司,也是專著于分子生物學研究產品開發的公司。在國內它的試劑產品賣的不多,處于推廣階段。stratagene的熒光定量pcr產品mx3005p同以上兩種產品技術參數也差不多96孔peltier半導體加熱,5通道,pmt檢測器,但是沒有梯度功能,用戶不能在這臺儀器上優化反應條件。另外有客戶反應該儀器做工較粗糙,噪音比較大,而且邊緣的孔做實驗的效果不太好,但是只要使用熱模塊中間的孔做實驗效果還是不錯的。這樣的問題問題在abi7500儀器上也同樣存在,但是stratagene的價格要實惠很多。
國產的:
西安天隆科技有限公司的tl988型實時熒光定量pcr儀
杭州博日的fqd-48a
做elisa試劑盒實驗需要的儀器有:酶標儀、恒溫箱、槍、槍頭、燒杯、濾紙.當然有自動洗板機最好.
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