PCR儀的功能？

PCR儀的功能？

用我自己的話說，就是pcr擴增儀是普通的pcr反應，反應后產物一般通過電泳查看結果。實時熒光pcr即real-timepcr，是在反應體系中加入目的基因的探針，pcr過程中，根據目標基因的表達量多少，探針可發熒光，rt-pcr儀通過檢測熒光表達量來記錄基因表達量，從而達到了同不定量檢測基因表達量，不需要電泳輔助。

如果一步pcr反應即可達到目標就直接用實時熒光pcr即可快速檢測，如果你的pcr反應需要兩步（如巢式pcr），第一步可以用普通pcr擴增儀，當然第一步也可以用實時熒光pcr，不放探針就行了，你不覺得這有點奢侈嗎......

價格，那得看哪產的了......一部進口的普通pcr可以比國產的rt-pcr貴很多。儀器也需要休息，我學校的一臺普通擴增儀幾乎一天用20個小時，到最后每天都會出問題，你舍得用進口的rt-pcr干這個嘛？pcr一頁可以說一分錢一分貨，舉一個例子，進口的pcr有的可以將溫度精確到0.1度，而且變溫速度也很重要，關鍵是看你做的實驗是否需要這么精確，是否需要進口高端級別的pcr

要做（mRNA）RT PCR，需要的儀器有哪些？

首先，RT不是證明RNA有無表達的很好方法，RT批豎激不出來會有很多原因，并不僅僅是沒有模板。建議你做northern。

做RT需要

1，很干凈整潔的實驗環境，RNA提取對操作環境的要求很高。

2，電動組織分散儀（IKA公司的T10那種）或研余亂襪缽+液氮或玻璃組織研磨器，以上提取效果遞減。

3，1.5ml管冷凍離心機。

4，移液槍1ml、200ul、10ul一套，最好專用。

5，紫外分光光度計、石英狹縫比色皿。

6，核酸電泳儀、電泳槽（電泳槽最好專用）陪搭

7，RNase

free的各式槍頭、1.5ml離心管；RNase

free的雙蒸水。

8，如果樣品不會立即進入下一步實驗，建議具備超低溫冰箱。

逆轉錄-聚合酶鏈反應

(reverse

transcription-polymerase

chain

reaction，rt-pcr)的原理是：提取組織或細胞中的總rna，以其中的mrna作為模板，采用oligo（dt）或隨機引物利用逆轉錄迅陸酶反轉錄成cdna。再以cdna為模板進行pcr擴增，而獲得目的基因或檢測基因表達。慶遲

也就是說rt-pcr的模板是mrna，它的產物是畝差頃cdna.