ecl顯影液原理？

一、ecl顯影液原理？

ECL在化學領域，是一種化學發光試劑。electrochemiluminescence

化學發光試劑，

一般是WesternBlot的最后一步，加入1：1的溶液A和溶液B，覆蓋pvdf膜，可以顯色來觀察實驗結果。

原理：

一般使用的發光液A和B分別是魯米諾和 過氧化氫，在 辣根過氧化物酶（HRP）的催化作用下，魯米諾與過氧化氫反應生成一種過氧化物，過氧化物不穩定隨即分解，形成一種能發光的電子激發中間體，當后者由激發態返回至基態，就會產生熒光。

在發光過程中不需要消耗HRP,HRP只是起催化作用，所以只要HRP沒降解失活，是可以重復加發光液的。但HRP作為一種蛋白酶，在室溫放置時間過長，是會降解的；同時在發光過程中有什么物質（比如顯影液）污染了膜的話,也有可能滅活膜上的HRP。

二、western blot完整實驗需要哪些儀器

主要就是SDS-PAGE電泳儀和轉膜儀,搖床,離心機,不需要別的儀器了,試劑藥品倒是要很多

三、western顯影試劑哪家公司的比較好用？給推薦，謝謝！

北京博奧森的好不錯，我們用過

四、western blot顯影問題

我曾經遇到過類似的情況，當時的情況是我們的顯影液經常室溫放置導致顯影液有點失效，你可以換一瓶新的顯影液。當然你的情況也有可能是第一次顯影時催化后產生的物質蓋住二抗的條帶。

五、western 曝光求助

western 曝光有很多問題需要注意，比如暗室，膠片，定影液顯影液。

剪膠片時需要確保絕對黑暗，最好不要用紅燈。如果曝光了的膠片，即使顯影過也會發白不透亮。

定影液顯影液需要避光保存。并且如果膠片與顯影液不匹配也會曝光不出條帶。曝光時間不夠，顯影液定影液順序，顯影時間不夠都會造成曝光失敗。