最近做熒光量子效率也出同樣的困擾
在查閱的文獻當中
大多都沒講明實驗的細節
主要的問題還是涉及紫外及熒光波長的選擇和溶劑折光率
找到一篇比較清楚的文獻
北京大學的
慈云祥,賈欣.熒光量子效率的簡化測量方法,分析化學,1986(8):616
看了收獲比較大，波長是選取紫外吸收圖譜中標物與樣品相交的平滑的曲線交點（保證A小于0.05
）
用其進行熒光激發
發射峰不需要積分面積
可用熒光強度代替
但是我仍存在到哪查找溶液折射率的問題？希望有知道的分享下實驗經驗
熒光計，包括通過透鏡與激勵濾光片光學連接的光源，與記錄濾光片光學連接的樣品池和記錄系統，其中，光源是脈沖式的，記錄系統是三通道式的，每一通道都包含一光電接收器，光電接收器與選通積分器連接，選通積分器的輸出端與模數轉換器相連，所述光電接收器中之一經緩沖放大器與模數轉換器連接，所有的選通積分器都與測量選通脈沖整形器連接，模數轉換器及測量選通脈沖整形器與控制裝置連接，所述控制裝置與顯示裝置連接。
熒光劑的工作原理是光源氙弧燈發出的光通過切光器使其變成斷續之光以及激發光單色器變成單色光后，此光即為熒光物質的激發光，被測的熒光物質在激發光照射下所發出的熒光，經過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上，由其所發生的光電流經過放大器放大輸至記錄儀。
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發光譜、發射光譜以及熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數，從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過對這些參數的測定， 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環境下的構象變化， 從而闡明分子結構與功能之間的關系。熒光分光光度計的激發波長掃描范圍一般是190~650nm，發射波長掃描范圍是200~800nm?？捎糜谝后w、固體樣品（如凝膠條）的光譜掃描。
由高壓汞燈或氙燈發出的紫外光和藍紫光經濾光片照射到樣品池中，激發樣品中的熒光物質發出熒光，熒光經過濾過和反射后，被光電倍增管所接受，然后以圖或數字的形式顯示出來。物質熒光的產生是由在通常狀況下處于基態的物質分子吸收激發光后變為激發態, 這些處于激發態的分子是不穩定的,在返回基態的過程中將一部分的能量又以光的形式放出，從而產生熒光。
不同物質由于分子結構的不同,其激發態能級的分布具有各自不同的特征，這種特征反映在熒光上表現為各種物質都有其特征熒光激發和發射光譜；，因此可以用熒光激發和發射光譜的不同來定性地進行物質的鑒定。在溶液中，當熒光物質的濃度較低時,其熒光強度與該物質的濃度通常有良好的正比關系,即IF=KC,利用這種關系可以進行熒光物質的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似，熒光分析通常也采用標準曲線法進行。
熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強、用樣量少、方法簡便、工作曲線線形范圍寬等優點，可以廣泛應用于生命科學、醫學、藥學和藥理學、有機和無機化學等領域。熒光分光光度計的發展經歷了手控式熒光分光光度計，自動記錄式熒光分光光度計，計算機控制式熒光分光光度計三個階段；熒光分光光度計還可分為單光束式熒光分光光度計和雙光束式熒光分光光度計兩大系列。其他的還有低溫激光Sh p ol’skill熒光分光光度計，配有壽命和相分辨測定的熒光分光光度計等。
紫外分光：
許多有機化合物在紫外區具有特征的吸收光譜,因此可用紫外分光光度法對有機物質進行定性鑒定,結構分析及定量測定．紫外分光光度法定量測定的依據是比耳定律.首先確定化合物的紫外吸收光譜,確定最大吸收波長.在選定的波長下,作出化合物溶液的工作曲線,根據在相同條件下測得待測液的吸光度值來確定待測液中化合物的含量.
物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果.由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或 測定該物質的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎.分光光度分析就是根據物質的吸 收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段.
紫外可見分光光度法的定量分析基礎是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律.即物質在一定濃度 的吸光度與它的吸收介質的厚度呈正比
凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物,根據在特定吸收波長處所測得的吸收度,可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定.
熒光分光：
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器.其能提供包括激發光譜、發射光譜以及熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數,從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況.通過對這些參數的測定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環境下的構象變化,從而闡明分子結構與功能之間的關系.熒光分光光度計的激發波長掃描范圍一般是190~650nm,發射波長掃描范圍是200~800nm.可用于液體、固體樣品（如凝膠條）的光譜掃描.
簡單來說,紫外分光主要用于對化學物質的鑒別、純度檢查及含量測定,熒光分光主要對經光源激發后產生熒光的物質或經化學處理后產生熒光的物質成份分析.其實兩者都可以對成分進行分析,但前者直接測物質對光的吸收峰,后者是檢測經光源激發后產生的熒光.